(Flow sitometriya, FCM) ləkələnmiş hüceyrə markerlərinin flüoresans intensivliyini ölçən hüceyrə analizatorudur. Bu, tək hüceyrələrin təhlili və çeşidlənməsi əsasında hazırlanmış yüksək texnologiyalı texnologiyadır. Hüceyrələrin ölçüsünü, daxili quruluşunu, DNT, RNT, zülalları, antigenlərini və digər fiziki və ya kimyəvi xassələrini tez ölçə və təsnif edə bilər və bu təsnifatların toplanmasına əsaslana bilər.
Axın sitometri əsasən aşağıdakı beş hissədən ibarətdir:
1 Axın kamerası və maye sistemi
2 Lazer işıq mənbəyi və şüa formalaşdırma sistemi
3 Optik sistem
4 Elektronika, saxlama, ekran və analiz sistemi
5 Hüceyrə çeşidləmə sistemi
Onların arasında, lazer işıq mənbəyində və şüa əmələ gətirən sistemdə lazer həyəcanlanması axın sitometriyasında flüoresan siqnalların əsas ölçülməsidir. Həyəcan işığının intensivliyi və məruz qalma müddəti flüoresan siqnalın intensivliyi ilə bağlıdır. Lazer tək dalğa uzunluğunda, yüksək intensivlikdə və yüksək dayanıqlı işıqlandırma təmin edə bilən əlaqəli işıq mənbəyidir. Bu tələblərə cavab vermək üçün ideal həyəcanlandırma işıq mənbəyidir.
Lazer mənbəyi ilə axın kamerası arasında iki silindrik linza var. Bu linzalar lazer mənbəyindən yayılan dairəvi en kəsiyi olan lazer şüasını daha kiçik kəsikli (22 μm × 66 μm) elliptik şüaya yönəldir. Bu elliptik şüa daxilində lazer enerjisi normal paylanmaya görə paylanır və lazer aşkarlama sahəsindən keçən hüceyrələr üçün ardıcıl işıqlandırma intensivliyini təmin edir. Digər tərəfdən, optik sistem çoxlu sayda linzalar, sancaqlar və filtrlərdən ibarətdir və onları təxminən iki qrupa bölmək olar: axın kamerasının yuxarı və aşağı axını.
Axın kamerasının qarşısındakı optik sistem linza və sancaq dəliyindən ibarətdir. Lens və sancaq dəliyinin əsas funksiyası (adətən iki linza və sancaq dəliyi) lazer mənbəyi tərəfindən buraxılan dairəvi en kəsiyi olan lazer şüasını daha kiçik kəsikli elliptik şüaya fokuslamaqdır. Bu, lazer enerjisini normal paylanmaya uyğun olaraq paylayır, lazer aşkarlama sahəsi boyunca hüceyrələr üçün ardıcıl işıqlandırma intensivliyini təmin edir və küçə işığından müdaxiləni minimuma endirir.
Üç əsas filtr növü var:
1: Uzun keçid filtri (LPF) - yalnız müəyyən bir dəyərdən daha yüksək dalğa uzunluğu olan işığın keçməsinə icazə verir.
2: Qısa keçid filtri (SPF) - yalnız müəyyən bir dəyərdən aşağı dalğa uzunluğu olan işığın keçməsinə icazə verir.
3: Bandpass filter (BPF) - yalnız müəyyən dalğa uzunluğu diapazonunda işığın keçməsinə imkan verir.
Fərqli filtr birləşmələri müxtəlif dalğa uzunluqlarında flüoresan siqnalları fərdi fotoçoğaltıcı borulara (PMTs) yönəldə bilər. Məsələn, PMT qarşısında yaşıl flüoresans (FITC) aşkar etmək üçün filtrlər LPF550 və BPF525-dir. PMT qarşısında narıncı-qırmızı flüoresansı (PE) aşkar etmək üçün istifadə edilən filtrlər LPF600 və BPF575-dir. PMT qarşısında qırmızı flüoresansın (CY5) aşkarlanması üçün filtrlər LPF650 və BPF675-dir.
Axın sitometriyası əsasən hüceyrələrin çeşidlənməsi üçün istifadə olunur. Kompüter texnologiyasının inkişafı, immunologiyanın inkişafı və monoklonal antikor texnologiyasının ixtirası ilə onun biologiya, tibb, əczaçılıq və digər sahələrdə tətbiqləri getdikcə genişlənir. Bu tətbiqlərə hüceyrə dinamikası təhlili, hüceyrə apoptozu, hüceyrə tiplənməsi, şiş diaqnozu, dərman effektivliyinin təhlili və s.
Göndərmə vaxtı: 21 sentyabr 2023-cü il
