(Axın sitometriyası, FCM), ləkələnmiş hüceyrə markerlərinin flüoresan intensivliyini ölçən bir hüceyrə analizatorudur. Bu, təhlil və vahid hüceyrələrin çeşidlənməsi əsasında hazırlanmış yüksək texnologiyalı bir texnologiyadır. Tez, daxili quruluşu, DNT, RNT, zülalları, antigen və ya digər fiziki və ya kimyəvi xüsusiyyətləri tez bir zamanda ölçə və təsnif edə bilər və bu təsnifatların toplanmasına əsaslana bilər.
Axın sitometri əsasən aşağıdakı beş hissədən ibarətdir:
1 axın kamerası və fluidika sistemi
2 lazer işıq mənbəyi və şüa formalı sistemi
3 optik sistem
4 Elektron, Anbar, Ekran və Təhlil Sistemi
5 hüceyrə çeşidləmə sistemi
Bunların arasında lazer işıq mənbəyi və şüa əmələ gətirmə sistemində lazer həyəcanı axın sitometriyasında flüoresan siqnallarının əsas ölçülməsidir. Həyəcan işığının intensivliyi və məruz qalma müddəti flüoresan siqnalının intensivliyi ilə əlaqədardır. Lazer, tək dalğa uzunluğu, yüksək intensivliyi və yüksək sabitliyini işıqlandıra biləcək uyğun bir işıq mənbəyidir. Bu tələblərə cavab verən ideal həyəcanvermə mənbəyidir.
Lazer mənbəyi və axın palatası arasında iki silindrik linza var. Bu linzalar lazer mənbəyindən daha kiçik bir kəsişmə ilə (22 mkm × 66 mkm) olan bir elliptik şüa daxil olan dairəvi bir çarpaz bölmə ilə lazer şüası ilə bir lazer şüası yönəldilmişdir. Bu elliptik şüa içərisindəki lazer enerjisi, lazer aşkarlama sahəsindən keçən hüceyrələr üçün ardıcıl işıqlandırma intensivliyinə uyğun olaraq normal bir paylanmaya görə paylanır. Digər tərəfdən, optik sistemi, iki qrupa bölünə bilən çoxsaylı linzalar, pinholes və filtrlərdən ibarət çox dəstdən ibarətdir.
Axın otağının qarşısında optik sistem bir lens və pinhole ibarətdir. Lens və pinhole (adətən iki linza və bir pinhole) əsas funksiyası lazer şüasını lazer mənbəyi tərəfindən daha kiçik bir kəsişmə ilə elliptik bir şüa ilə yayılmış bir çarpaz bölmə ilə yönəltməkdir. Bu, lazer enerjisini normal bir paylanmasına görə, lazer aşkarlama sahəsi üzrə hüceyrələr üçün ardıcıl işıqlandırma intensivliyinə uyğun olaraq, lazerli işıqlandırma intensivliyini və hiylə işığının azalmasını təmin edir.
Filtrlərin üç əsas növü var:
1: Uzun Pass Filter (LPF) - yalnız dalğa uzunluqları ilə keçmək üçün müəyyən bir dəyərdən daha yüksək işığa imkan verir.
2: Qısa keçid filtri (SPF) - yalnız dalğa uzunluqları ilə keçmək üçün müəyyən bir dəyərin altından yüngülləşdirməyə imkan verir.
3: BandPass Filter (BPF) - yalnız müəyyən bir dalğa uzunluğunda keçid aralığında işığa imkan verir.
Filtrlərin fərqli birləşmələri fərqli dalğa uzunluğunda floresan güc siqnallarını fərdi fotomultiplier borulara (PMTS) -ə apara bilər. Məsələn, PMT-nin qarşısında Yaşıl Floresance (Fitc) aşkar etmək üçün filtrlər LPF550 və BPF525-dir. PMT-nin qarşısında narıncı-qırmızı flüoresan (PE) aşkar etmək üçün istifadə olunan filtrlər LPF600 və BPF575-dir. PMT-nin qarşısında qırmızı flüoresan (Cy5) aşkar etmək üçün filtrlər LPF650 və BPF675-dir.
Axın sitometriyası əsasən hüceyrə çeşidlənməsi üçün istifadə olunur. Kompüter texnologiyasının inkişafı, immunologiyanın inkişafı və monoklonal antikor texnologiyasının ixtirası, biologiya, tibb, aptek və digər sahələrdə tətbiqləri getdikcə geniş yayılmışdır. Bu tətbiqlərə hüceyrə dinamikası, hüceyrə apoptozu, hüceyrə yazması, şiş diaqnozu, dərman effektivliyi təhlili və s.
Time vaxt: Sep-21-2023
